Эритроциты у человека и млекопитающих представляют собой безъядерные клетки, утратившие в процессе фило- и онтогенеза ядро и большинство органелл. Эритроциты являются высокодифференцированными постклеточными структурами, неспособными к делению.
Основная функция эритроцитов — дыхательная — транспортировка кислорода и углекислоты. Эта функция обеспечивается дыхательным пигментом —гемоглобином. Кроме того, эритроциты участвуют в транспорте аминокислот, антител, токсинов и ряда лекарственных веществ, адсорбируя их на поверхности плазмолеммы.
Форма и строение эритроцитов. Популяция эритроцитов неоднородна по форме и размерам. В нормальной крови человека основную массу составляют эритроциты двояковогнутой формы — дискоциты (80—90%). Кроме того, имеются планоциты (с плоской поверхностью) и стареющие формы эритроцитов:
- шиповидные эритроциты, или эхиноциты,
- куполообразные, или стоматоциты,
- шаровидные, или сфероциты.
Процесс старения эритроцитов идет двумя путями:
- кренированием (т.е. образованием зубцов на плазмолемме),
- путем инвагинации участков плазмолеммы.
При кренировании образуются эхиноциты с различной степенью формирования выростов плазмолеммы, которые впоследствии отпадают.
При этом формируется эритроцит в виде микросфероцита. При инвагинации плазмолеммы эритроцита образуются стоматоциты, конечной стадией которых также является микросфероцит.
Одним из проявлений процессов старения эритроцитов является их гемолиз, сопровождающийся выхождением гемоглобина; при этом в крови обнаруживаются т.н. «тени» эритроцитов – их оболочки. Обязательной составной частью популяции эритроцитов являются их молодые формы, называемые ретикулоцитами или полихроматофильными эритроцитами.
В норме их от 1 до 5% от количества всех эритроцитов. В них сохраняются рибосомы и эндоплазматическая сеть, формирующие зернистые и сетчатые структуры, которые выявляются при специальной суправитальной окраске. При обычной гематологической окраске (азур II — эозином) они проявляют полихроматофилию и окрашиваются в серо-голубой цвет.
При заболеваниях могут появляться аномальные формы эритроцитов, что чаще всего обусловлено изменением структуры гемоглобина (Нb). Замена даже одной аминокислоты в молекуле Нb может быть причиной изменения формы эритроцитов.
В качестве примера можно привести появление эритроцитов серповидной формы при серповидно-клеточной анемии, когда у больного имеет место генетическое повреждение в ?-цепи гемоглобина.
Процесс нарушения формы эритроцитов при заболеваниях получил название пойкилоцитоз.
Как было сказано выше, в норме количество эритроцитов измененной формы может быть около 15% — это т.н. физиологический пойкилоцитоз. Размеры эритроцитов в нормальной крови также варьируют.
Большинство эритроцитов имеют диаметр около 7,5 мкм и называются нормоцитами. Остальная часть эритроцитов представлена микроцитами и макроцитами. Микроциты имеют диаметр 8 мкм.
Изменение размеров эритроцитов называется анизоцитозом.
Плазмолемма эритроцита состоит из бислоя липидов и белков, представленных приблизительно в равных количествах, а также небольшого количества углеводов, формирующих гликокаликс. Наружная поверхность мембраны эритроцита несет отрицательный заряд. В плазмолемме эритроцита идентифицировано 15 главных белков. Более 60% всех белков составляют:
- примембранный белок спектрин,
- мембранные белки — гликофорини т.н. полоса 3.
Спектрин является белком цитоскелета, связанным с внутренней стороной плазмолеммы, участвует в поддержании двояковогнутой формы эритроцита. Молекулы спектрина имеют вид палочек, концы которых связаны с короткими актиновыми филаментами цитоплазмы, образуя т.н. «узловой комплекс». Цитоскелетный белок, связывающий спектрин и актин, одновременно соединяется с белком гликофорином.
Эритроциты:
- участвуют в транспорте аминокислот и полипептидов,
- регулируют их концентрацию в плазме крови, т.е. выполняют роль буферной системы.
Постоянство концентрации аминокислот и полипептидов в плазме крови поддерживается с помощью эритроцитов, которые адсорбируют их избыток из плазмы, а затем отдают различным тканям и органам.
Таким образом, эритроциты являются подвижным депо аминокислот и полипептидов. Средняя продолжительность жизни эритроцитов составляет около 120 дней.
В организме ежедневно разрушается (и образуется) около 200 млн эритроцитов.
Источник: https://vseobiology.ru/gistologiya/162-8-eritrotsity-ikh-kolichestvo-forma-stroenie-razmery-khimicheskij-sostav-funktsiya-prodolzhitelnost-zhizni-retikulotsity
Эритроциты — урок. Биология, Человек (8 класс)
Эритроциты, или красные кровяные тельца, — маленькие безъядерные двояковогнутые дисковидные клетки (в (1) мм³ крови человека содержится примерно (5,5) млн эритроцитов).
Функция эритроцитов — дыхательная (доставка к тканям кислорода и удаление углекислого газа). Двояковогнутая форма эритроцита создаёт большую поверхность клетки, что улучшает процесс газообмена (общая поверхность всех эритроцитов одного человека больше футбольного поля!).
Внутри эритроцитов находятся молекулы ярко-красного дыхательного пигмента — гемоглобина, который делает кровь красной.
Гемоглобин состоит из двух частей: белковой — глобина — и железосодержащей — гема.
Гемоглобин способен легко присоединять кислород. Соединение гемоглобина с кислородом имеет ярко-красный цвет. Кровь, насыщенную кислородом, называют артериальной.
Соединение гемоглобина с кислородом нестойкое. При его распаде вновь образуются гемоглобин и свободный кислород, который поступает в клетки тканей. Кровь, обеднённую кислородом, называют венозной.
Эритроциты образуются в красном костном мозге. В процессе созревания они теряют ядро и становятся безъядерными.
Продолжительность жизни эритроцита — около (120) дней (затем он разрушается в печени или селезёнке).
При плохом питании, больших потерях крови, при нарушении образования эритроцитов развивается малокровие (уменьшение числа эритроцитов в крови или понижение содержания в них гемоглобина). Восстановлению нормального содержания гемоглобина в крови способствуют хорошее питание, отдых и пребывание на свежем воздухе.
Источник: https://www.yaklass.ru/p/biologia/chelovek/krovenosnaia-i-limfaticheskaia-sistemy-16070/vnutrenniaia-sreda-organizma-krov-i-limfa-16034/re-e3ea60b2-d58a-4fc3-bb2f-ecffd64362f3
Анализ крови на эритроциты: от показаний к назначению до расшифровки результатов
Снабжение организма кислородом — крайне сложный механизм. После того, как человек совершает вдох и воздух попадает в легкие, в процесс включаются специальные клетки крови — эритроциты.
Именно они доставляют кислород к каждой клетке нашего тела. Сбои в работе этих форменных телец крови зачастую являются следствием серьезных патологий.
Для того чтобы вовремя выявить заболевания, связанные с нарушением функций эритроцитов, необходимо всего лишь сдать общий анализ крови.
Эритроциты и их обозначение в бланке анализа крови
Главная задача эритроцитов в нашем организме — перенос кислорода к тканям и органам. Также данные частицы отвечают за обратный процесс — доставку углекислого газа в легкие. Исследование количества и функциональных характеристик данных частиц способно выявить ряд серьезных патологических изменений.
Исследование эритроцитов входит в общий клинический анализ крови. эритроцитов в крови обозначается аббревиатурой RBC (единицы измерения — млн/мкл). Также часто можно встретить сокращения СОЭ (мм/час), MCV (фл), MCH (пг) и другие. Ниже мы разберем все эти показатели подробно.
Показания к назначению исследования
Одной из частых причин назначения исследования на уровень эритроцитов в крови является подозрение на анемию либо определение ее типа, а также контроль хода лечения.
Как уже отмечалось выше, общий анализ крови включает в себя подсчет эритроцитов и оценку их функциональных характеристик, так что данное исследование проходит каждый участник диспансеризации, а также все пациенты перед любой хирургической операцией.
Как проводится анализ?
Перед тем как отправиться на анализ крови, следует выполнить несколько рекомендаций по подготовке. Врачи советуют исключить прием пищи как минимум за 4 часа до процедуры забора крови, а также постараться провести день накануне без тяжелых физических и эмоциональных нагрузок. Все это может исказить результаты анализа.
Оптимальным вариантом является посещение клиники утром, натощак. Если для контроля лечения или детальной диагностики требуется сдавать кровь несколько раз, то следует повторять процедуру в одно и то же время, в аналогичном состоянии, в одной и той же клинике.
В этом случае влияние сторонних факторов на результаты будет минимальным.
Кровь для клинического анализа берут из пальца (капиллярная кровь) или из вены (венозная кровь). Первый метод постепенно отходит на второй план, ведь анализы венозной крови значительно точнее и информативнее.
Это интересно На основании различий антигенных характеристик эритроцитов определяют группу крови человека. Не так давно ученые из Канады доказали возможность создания специального фермента, который сделает эритроциты универсальными. Это значительно упростит процедуру донорства.
Забор крови проводит медсестра или сотрудник лаборатории. Перед тем как ввести иглу в вену на локтевом сгибе, лаборант накладывает специальный жгут на предплечье пациента и просит его несколько раз сжать и разжать кулак для того, чтобы обеспечить прилив крови.
Затем место будущего прокола протирают спиртовым тампоном и вводят в вену иглу, по которой кровь поступает в шприц или специальную пробирку.
После того как необходимое количество крови набрано (обычно не более 5 мл), иглу извлекают, а к месту прокола прикладывают ватный тампон, смоченный в спирте.
Для пациента вся процедура занимает не более 5 минут и может вызывать слабые болевые ощущения (при условии, что лаборант или медсестра владеют навыками забора крови на профессиональном уровне). На этом процедура взятия анализа для пациента заканчивается, и к работе приступают сотрудники лаборатории.
Полученный материал помещают в специальное устройство — анализатор, который автоматически подсчитывает количество каждого вида клеток, в том числе и эритроцитов. При выявлении отклонений от нормы или аномальных клеток, анализ перепроверяет сотрудник лаборатории, дополняя результат исследования своими наблюдениями под микроскопом.
На сегодняшний момент не каждая клиника оснащена современными анализаторами, так что иногда подсчет количества клеток производится рутинным методом, то есть вручную, с помощью микроскопа. Результат вы сможете получить в течение 1–7 дней, в зависимости от скорости работы учреждения и метода подсчета клеток.
Имейте в виду, что сотрудники лабораторий лишь вписывают в бланк анализа полученные показатели, а их расшифровку и постановку диагноза осуществляет врач.
Эритроциты в результатах анализа: норма и патологии
Бланк общего анализа крови представляет собой таблицу с полученными показателями по каждому пункту исследования, в том числе с количеством и общими характеристиками эритроцитов, ретикулоцитов (незрелая форма клетки), а также содержанием гемоглобина в одном эритроците. Для каждого параметра здесь же указаны значения, которые соответствуют норме.
Уровень эритроцитов в крови
Нормальное содержание эритроцитов в крови человека зависит от его возраста и пола. Для новорожденных в возрасте до 2-х недель оно составляет 3,9–5,9 миллионов клеток на микролитр крови, среди которых 0,15–1,5% должны составлять ретикулоциты.
По мере взросления ребенка верхняя и нижняя границы нормы меняются, но в среднем для детей до 12 лет они составляет 3,8–4,9 млн/мкл при 0,2–1,3% незрелых форм клеток. Для женщин норма эритроцитов в крови составляет 3,7–4,7 млн/мкл, а количество ретикулоцитов соответствует 0,12–2,05%.
У мужчин нормальные показатели немного другие — 4–5,15 млн/мкл эритроцитов и 0,24–1,7% ретикулоцитов.
Эритроцитоз, то есть повышенное количество эритроцитов в крови, может быть следствием полицитемии, болезни Вакеза, эритремии. Также подобный эффект наблюдается при длительном обезвоживании. Симптомы зависят от конкретного заболевания.
На заключительных стадиях эритроцитоз проявляется покраснением и зудом кожного покрова, сильными головными болями (с нарушением слуха и зрения), а также повышенным тромбообразованием в связи со сгущением крови.
Если уровень ретикулоцитов повышен, это значит, что эритроцитов в крови осталось мало, и костный мозг старается активно восполнить потери.
Снижение уровня эритроцитов (эритропения) характерно для анемии различных типов, а также при избыточном содержании воды в организме. Симптомы обычно проявляются в виде общей слабости, частых инфекционных заболеваний и длительного повышения температуры тела на 1–1,5 градуса. А вот снижение уровня ретикулоцитов может быть спровоцировано болезнями почек, костного мозга, анемией и алкоголизмом.
Обратите внимание Анемия — заболевание, связанное с падением уровня гемоглобина в крови, часто сопровождается уменьшением количества эритроцитов. По данным Всемирной организации здравоохранения, с этой патологией живут около 2 миллиардов человек на Земле.
Уровень гемоглобина
Для новорожденных (1–3 дня) нормальным содержанием гемоглобина в крови является 145–225 г/л, а к 3–6 месяцам достигает минимального уровня 95–135 г/л. С возрастом значение снова увеличивается — для женщин нормой гемоглобина становится 120–150 г/л, а для мужчин — 130–160 г/л.
Снижение уровня этого белка в эритроцитах может быть вызвано железодефицитной анемией, кровопотерями, несбалансированным питанием. Повышенный гемоглобин характерен для жителей высокогорных областей, а также для спортсменов. К патологическим причинам относятся легочная недостаточность, наличие злокачественных опухолей в организме и непроходимость кишечника.
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
Инфекционные и воспалительные процессы в организме влияют на уровень СОЭ. Для детей до 10 лет нормальным значением принято считать 0–10 мм/ч, для женщин — 2–15 мм/ч, а для мужчин — 1–10 мм/ч.
Повышение скорости оседания эритроцитов в общем анализе крови характерно для пожилых людей (старше 50 лет), а также во время беременности, менструации и некоторое время после родов. Самыми распространенными патологическими причинами являются воспаления и инфекции, травмы, анемия и злокачественные опухоли.
А слишком низкую СОЭ вызывают истощение, вегетарианская диета и повышенное содержание воды в организме.
Размеры эритроцитов
Когда говорят о размере эритроцита, чаще всего имеют в виду его диаметр. У здорового человека он составляет 6,2–8,2 мкм.
Появление в анализе крови эритроцитов небольших размеров (микроцитоз) наблюдается при железодефицитной анемии и наследственном сфероцитозе.
Макроцитоз, то есть увеличение размеров эритроцитов, характерно для некоторых видов анемии, лейкоза, дефицита витаминов группы B и заболеваний печени.
Форма эритроцитов
Красные кровяные тельца имеют форму двояковыпуклого диска, а ее изменение говорит о наличии патологий в организме. Например, генетическое повреждение цепи гемоглобина придает эритроциту серповидную форму.
При сфероцитозе клетки становятся круглой формы — это наследственное заболевание также связано с нарушением генетического кода. Эритроциты овальной формы могут присутствовать в крови здорового человека, но если их содержание превышает 10%, это свидетельствует о эллиптоцитозе.
Эти и другие отклонения от нормы провоцируют быструю гибель клеток в селезенке.
Эритроцитарные индексы
Существуют общепринятые значения, основанные на вычислении усредненных показателей для одного эритроцита, так называемые эритроцитарные индексы. К ним относятся:
- средний объем эритроцита (MCV) в анализе крови у взрослого человека должен составлять 80–95 фемтолитров (фл). У новорожденных границы нормы значительно шире — от 80 до 140 фл, а от года до 12 лет нормальными значениями считаются 73–90 фл. Повышенные показатели MCV характерны для таких патологий, как анемия, гипотиреоз, а также могут быть выявлены при злоупотреблении алкоголем, курении и недостатке витамина B12. Значения ниже нормы наблюдаются при талассемии и железодефицитной анемии;
- содержание гемоглобина в эритроците (MCH) у взрослого здорового человека составляет 27–31 пикограмм (пг). Самые высокие показатели отмечаются у малышей до 2-х недель — от 30 до 37 пг, и по мере взросления ребенка постепенно приходят к обычной норме. Если в анализе крови врач обнаружит повышенный показатель MCH, то, скорее всего, возникнут подозрения на некоторые виды анемии, патологии печени и дефицит B12, а если пониженный — определенные типы гемоглобинопатии или анемию хронических заболеваний;
- средняя концентрация гемоглобина в эритроцитарной массе (MCHC) , то есть насыщенность клетки гемоглобином. Нормальный показатель для взрослых — 300–380 г/л. В организме новорожденного младенца (до 1 месяца) MCHC составляет 280–360 г/л, а для детей до 12 лет характерен показатель в 290–380 г/л. Причиной повышенного значения этого показателя является наследственная микросфероцитарная анемия, а пониженного — гемоглобинопатия и железодефицитная анемия;
- RDW — ширина распределения эритроцитов, которая показывает неоднородность объемов клеток в анализе крови. Эта величина измеряется в процентах, для детей меньше 6 месяцев норма составляет 14,9–18,7%, а в возрасте от 6 месяцев и выше (включая и зрелый возраст) находится в границах 11,6–14,8%. Повышенное значение RDW означает наличие какого-либо вида анемии.
Как видите, исследование эритроцитов может стать источником ценной информации для врача. Тем не менее, любое отклонение от нормы, выявленное в ходе общего анализа крови, требует дополнительных диагностических процедур. Поэтому постановка точного диагноза зависит от целого комплекса мер, направленных на выяснение причины отклонения любого из параметров эритроцитов от нормы.
Источник: https://www.eg.ru/digest/analiz-krovi-na-ieritrotsity.html
Эритроциты человека
Важным элементом в содержании крови являются эритроциты.
Максимальное содержание этих уникальных клеток в организме находится именно в крови, но эти элементы присутствуют так, же и других форменных элементах человеческого организма. Внешний вид эритроцитов напоминает дисковидную форму с утолщёнными краями.
Такая обтекаемая форма кровяных телец позволяет им безпрепятсвенно циркулировать по всей кровяной системе человека.
Основной функцией эритроцитов является снабжение внутренних органов и клеток человеческого организма необходимым количеством кислорода.
Оптимальное содержание этих элементов крови, а так же в моче должно, как правило, соответствовать определённой норме.
Если уровень содержания эритроцитов в моче является повышенным, это говорит о том, что организме человека происходят какие-либо изменения и возможно это первый признак заболеваний. Диаметр эритроцита составляет 7,5 мкм
Так же данные частицы присутствуют и в костном мозге, и в их состав входит такой элемент, как гемоглобин. В зависимости от количества элементов гемоглобина в составе крови можно определить её цвет. Период полезной работы эритроцитов, точнее, каждого их этих элементов составляет около ста двадцати дней.
- Если человек не имеет, ни каких заболеваний и определённых изменений, связанных с корректной работой организма, оптимальное содержание эритроцитов в моче человека должна полностью соответствовать следующим показателям. Эритроциты норма:
- — для женского организма от 0 до 3 эритроцитов;
- — для мужского организма от 0 до 1 эритроцита.
Если содержание этих элементов в мочевых выделениях не соответствует данным значениям и превышает их, то это свидетельствует о таком явлении, как гематурия. Стоит отметить, что в течение одних суток из организма человека выходит через мочевые выделения около двух миллионов эритроцитов.
Как правило, повышенный уровень содержания кровяных эритроцитов в моче человека можно легко определить визуально – мочевые выделения имеют бурый или красноватый оттенок.
Эритроциты не имеют ядра и не окисляются кислородом. Клетки, которые переносят кислород — сами его не потребляют, а используют низко эффективную систему получения энергии — анаэробный гликолиз.
Эритроциты придают крови красный цвет, а продукты их распада придают характерный цвет моче и калу. Это происходит благодаря присутствующему в составе эритроцитов (точнее в составе гемоглобина) железа и порфиринов
Эритроциты живут 120 дней. Рождаются в красном костном мозге (губчатые кости таза, грудина, ребра и другие), циркулируют в крови и умирают в селезенке (ретикулоэндотелиальной системе).
Их останки собираются печенью и после переработки выделяются в кишечник, окрашивая кал в характерный цвет.
Частично этот “краситель” всасывается из кишечника в кровь и выделяется вместе с мочой, окрашивая и мочу.
Эритроциты одного человека могут слипаться с эритроцитами другого (агглютинировать). Поэтому перед переливанием крови необходимо проверять группы крови донора и реципиента. Ныне принята система оценки групп крови — АВ0.
Однако, она не является достаточно точной. Групп крови больше, чем 4 из системы АВ0. Поэтому, даже кровь из одной группы, редко, но может давать агглютинацию.
То есть даже кровь одной группы может быть не совместима с кровью той же группы.
Эритроциты способны переносить кислород. Молекула кислорода в легких присоединяется к железу, который находится в составе гемоглобина, и отправляется в ткани, где условия несколько изменяются и кислород отсоединятся от железа. Так осуществляется транспорт кислорода.
- Из тканей эритроциты забирают углекислый газ по той же схеме и освобождают его в легких.
- Также эритроциты, за счет гемоглобина, борются с кислотностью внутри организма, забирая на себя протоны водорода, избыток которых создает саму кислотность (так называемая гемоглобиновая буферная система крови).
- Эритроциты участвуют в образовании красного тромба, забиваясь вместе с фибрином в поврежденную стенку сосуда.
Проникновение кровяных телец в мочевые выделения
При появлении в составе мочи повышенного уровня содержания кровяных эритроцитов можно говорить о возможном заболевании таких внутренних органов, как почки, предстательная железа, мочевой пузырь и мочеиспускательный канал, а так же мочеточники. В отдельных случаях это может быть связанно с такими заболеваниями, как опухоль почек, пиелонефрит, цистит, нефроз, камни в почках, различные повреждения почек, гипертонические заболевания и многое другое.
Повышенное содержание эритроцитов в мочевых выделениях женского организма
При возникновении повышенного содержания эритроцитов в моче женского организма необходимо определить, не связано ли это явление с процессами эндометриоза или менструальными циклами. Для этого женщина сдаёт повторные анализы посредством использования катетера.
При подтверждении предыдущих результатов в обязательном порядке необходимо провести полное обследование системы вывода мочи.
При выявлении полного отсутствия эритроцитов в мочевых выделениях посредством использования катетера можно смело говорить о наличии возможных гинекологических изменениях в женском организме.
Изменённые и неизменённые формы эритроцитов в составе крови
Эритроциты являются уникальными элементами, которые могут изменять свой внешний вид в зависимости от их количества в мочевых выделениях и от реакции мочи.
Как правило, в организме человека можно встретить две формы эритроцитов – это неизменённая форма, так называемые свежие эритроциты и изменённая форма к которой относятся выщелоченные элементы.
Время пребывания кровяных телец в мочевых выделениях можно определить отношением их количества изменённой формы к количеству элементов неизменённой формы. При пребывании эритроцитов в моче их внешний вид становится более тусклым, и этот процесс полностью зависит от показателей кислотности мочевых выделений.
Появление в мочевых выделениях неизменённой формы эритроцитов связанно с возникновением заболеваний системы вывода мочи. Как правило, это является следствием таких заболеваний, как цистит, опухоль простаты или мочекаменная болезнь.
Возникновение изменённой формы эритроцитов в моче человека в основном связанно с различными заболеваниями почек. Об этом может свидетельствовать обнаружение в составе мочи элементов белка и цилиндров.
В некоторых случаях гематурия возникает в процессе влияния интенсивных физических нагрузок, однако, повышенное содержание кровяных телец в данном случае за очень короткое время приходит в необходимую норму.
Если в мочевых выделениях обнаружены кровяные тельца и цилиндры одновременно это свидетельствует о внутрипочечном характере происхождения гематурии.
При полном отсутствии элементов белка и цилиндров процесс гематурии не связан с почками.
При обнаружении эритроцитов в мочевых выделениях пациента необходимо в обязательном порядке провести тщательное полное обследование организма и осуществить взятие повторных анализов мочи больного.
Для качественного определения содержания эритроцитов в мочевых выделениях применяют метод взятия пробы посредством трёх стаканов.
Способ взятия трёхстаканной пробы
Посредством использования данного метода можно определить источник кровотечения в мочевых выделениях человека. Данный уникальный метод подразумевает взятие проб мочи в три различные ёмкости. Пациент должен в течение одного акта мочеиспускания последовательно наполнить каждую из ёмкостей.
- При выявлении повышенного уровня эритроцитов в первой ёмкости источником кровотечения является канал мочеиспускания.
- Если повышенное содержание кровяных телец обнаружено в ёмкости номер два, то, скорее всего, происходят изменения в мочевом пузыре.
- Если количество эритроцитов одинаковое во всех трёх емкостях, то это свидетельствует о заболевании почек или мочеточников.
Наличие эритроцитов в моче ребёнка
Для того, что бы содержание кровяных телец в детской моче соответствовала норме необходимо в обязательном порядке включить в детский рацион пищу с содержанием щелочных элементов, но без содержания холестерина.
При наличии в детском рационе чрезмерного количества кислой пищи провоцируется возникновение повышенного содержание солей, которые при прохождении через кровь в организме могут вызывать повреждения тканей и попадание кровяных телец в мочевые выделения малыша.
Специальный щелочной рацион для ребёнка включает такие виды продуктов, как гречневая каша, все виды овощей, очищенная вода, определённые сорта орехов, заранее замоченные в воде.
Заболевания, связанные с эритроцитами
Существует болезнь крови — порфирия (порфириновая болезнь).
При этой болезни эритроциты с гемоглобином очень слабые и быстро разрушаются, солнечные лучи быстро обжигают кожу (фотодерматоз), происходит атрофия костей, хрящей и ногтей (видоизменяются зубы, уши, нос, ногти), и таким больным часто необходимо переливать кровь для сохранения жизни. Отсюда берут свое начало легенды о вампирах.
Существует заболевание крови (талассемия, анемия Кули) при котором гемоглобин укладывается меньшими порциями в большее число эритроцитов. При этой анемии дети отстают в развитии, однако есть и один плюс — они имеют врожденную защиту от практически смертельного заболевания — малярии.
Источник: http://anatomus.ru/ax9
Методы исследования эритроцитарных показателей
- Эритроциты самая многочисленная популяция клеток крови. У взрослого человека в физиологических условиях:
- — Число циркулирующих эритроцитов составляет около 2 л (кг)
- — Длительность циркуляции – 100-120 дней
- — Диаметр 7-8 мкм, площадь поверхности –140 мкм2, объем 90 мкм3 (такую большую поверхность клетка имеет благодаря дискоидной двояковогнутой
- форме , которая совместно с высокой пластичностью и деформируемостью мембраны позволяет ей проходить через капилляры, проникать через стенки синусоидов, возвращаясь к исходным параметрам) .
- Эритроцит — безъядерная клетка, имеющая форму двояковогнутого диска с кольцеобразным утолщением по краям.
- Функции эритроцитов:
- — участие в газообмене(благодаря его способности связывать кислород и углекислый газ)
- — участие в гемостазе
- — поддержание буферного ионно-водного равновесия
- — участие в иммунном ответе
- — транспорт аминокислот, липидов, токсинов
- — участие в ферментативных процессах
- Факторы влияющие на правильность определения числа эритроцитов:
- — Подготовка пациента
- — Нарушения в технологии забора крови
- — высокий лейкоцитоз
- — гигантские тромбоциты
- — агглютинация эритроцитов
- — криоглобулинемия
- — микроцитоз (< 36 фл )
- Методы определения количества эритроцитов в крови.
- — Подсчет количества эритроцитов в счетной камере
- — Кондуктометрический метод
- ( м-д Культера)
- Источниками ошибок при подсчете эритроцитов в счетной камере являются:
- — Неточное взятие крови в пипетку.
- — Образование сгустка, поглощающего часть клеток и занижающего результат исследования.
- — Недостаточное перемешивание содержимого пробирки перед заполнением камеры.
- — Неправильная подготовка камеры: недостаточное притирание покровных стекол; неравномерное заполнение камеры, образование пузырьков воздуха.
- — Подсчет эритроцитов сразу после заполнения камеры, не выжидая 1 минуту.
- — Подсчет меньшего, чем требуется по методике, количества квадратов.
- — Плохо вымытые камера, пробирки, пипетка, капилляр для взятия крови; недостаточно просушенные пробирки и пипетки.
- — Использование недоброкачественного разводящего раствора
- Индексы эритроцитов.
В лабораторной и клинической практике используются различные индексы, позволяющие количественно характеризовать средний объем эритроцитов, степень их насыщения гемоглобином, анизоцитоз. Часть этих индексов можно рассчитать, исходя из концентрации гемоглобина, числа эритроцитов, показателя гематокрита, некоторые индексы определяют только автоматические гематологические анализаторы.
- Цветовой показатель.
- отражает относительное содержание гемоглобина в эритроците. Вычисляется цветовой показатель по формуле:
- ЦП = 3хНВ(опыт)/ эритроциты (первые три цифры
Цветовой показатель определяется в условных единицах и имеет отвлеченное значение. Нормальные величины — 0,86-1,05.
В настоящее время значительно точнее и надежнее для оценки насыщения эритроцитов гемоглобином рассчитывать среднее содержание гемоглобина в эритроцитах.
Средний объем эритроцита ((MCV)
— Средний объем эритроцита (MCV) вычисляется путем деления гематокритной величины 1 мм3 крови на число эритроцитов.
Результат выражают в кубических микронах (мкм3), или в фемтолитрах (фл).
На практике средний объем эритроцита вычисляют путем умножения гематокрита (%) на 10 и деления полученного произведения на число эритроцитов в миллионах в кубическом миллиметре крови:
Гематокрит (%) х 10
— MCV=________________________________
Число эритроцитов (млн.кл./ мм3)
— MCV является более объективным параметром, чем визуальная оценка диаметра эритроцитов.
— Нормальные величины: 80-95 фл (мкм3).
— Показатель MCV меняется в течение всей жизни: у новорожденных он достигает 128 фл, в течение первой недели снижается до уровня 100 -112 фл, к шести месяцам падает до 78 фл, к году составляет 77-79 фл, в возрасте 4-5 лет нижняя граница (80 фл) нормы стабилизируется. Снижение MCV менее 80 фл расценивается как мик-роцитоз, увеличение свыше 95 фл — как макроцитоз.
- Среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН)
- Среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) устанавливается по формуле:
- Гемоглобин (г/л)
- мсн= _______________________________
- Число эритроцитов (млн./мкл)
Результат выражают в пикограммах (пг), норма составляет 27-31 пг. Этот показатель характеризует среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците. Он аналогичен цветовому показателю.
- На основе этих индексов анемии разделяют на нормо-, гипо- и гиперхромные.
- Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС)
- — Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС) вычисляется путем деления концентрации гемоглобина в г/100 мл на гематокрит и умножения на 100:
- Гемоглобин (г/дл)
- — МСНС = _______________________________ х 100
- Гематокрит (%)
- МСНС отражает насыщение эритроцита гемоглобином и в норме составляет 30-38 г/дл.
— В отличие от МСН МСНС не зависит от клеточного объема и является чувствительным тестом при нарушениях процессов гемоглобинообразования. Предельная концентрация гемоглобина (38 г/дл) встречается редко.
- Нормальные показатели количества эритроцитов
- — Мужчины 4,0-5,0 х 1012/л
- — Женщины 3,9-4,7
- — дети 1 час 5,23-6,65
- — 1 день 6,41-6,77
- — 1 неделя 5,06-6,22
- — 1 месяц 4,1-5,3
- — 2 месяца 3,6-4,8
- — 3-6 месяцев 3,7-4,8
- — 1 год 3,8-4,72
- — 15 лет 4,0-4,8
- Морфологические особенности эритроцитов при патологии
- Анизоцитоз – эритроциты разнообразной величины:
- Нормоцит — диаметр 7,1 -7,9 мкм
- Микроцит – диаметр < 6.5 мкм — микроцитоз
- Макроцит – диаметр > 8 мкм — макроцитоз
- Мегалоцит – диаметр >12 мкм
- Шизоциты (оторванные частицы эритроцитов) – диаметр 2-3 мкм
- Микросфероцит – уменьшение диаметра и увеличение толщины
- Пойкилоцитоз – изменение формы эритроцитов:
- Овалоцит – эритроцит овальной формы
- Акантоциты – эритроцит звездчатой формы
- Стоматоциты – эритроцит с центральным просветлением в виде «полулуния»
- Дрепаноциты – серповидная форма эритроцитов
- Гипохромия — снижение содержания Нв в отдельных эритроцитах
- Гиперхромия – увеличение толщины эритроцита, без повышения насыщения их Нв
- Полихроматофилия – недостаточное накопление Нв в эритроцитах с остатком базофильной субстанции.
Источник: https://dendrit.ru/page/show/mnemonick/difdiag09/
Кровь. Часть 4. Эритроциты
В этой части речь идет о размере, количестве и форме эритроцитов, о гемоглобине: его строении и свойствах, о резистентности эритроцитов, о реакции оседания эритроцитов — РОЭ.
Эритроциты
Размер, количество и форма эритроцитов
Эритроциты — красные кровяные тельца — несут в организме дыхательную функцию. К ее выполнению хорошо приспособлены размер, количество и форма эритроцитов. Эритроциты человека — мелкие клетки, диаметр которых равен 7,5 мкм.
Количество их велико: всего в крови человека циркулирует около 25×1012 эритроцитов. Обычно определяют число эритроцитов в 1 мм3 крови. Оно составляет 5000000 у мужчин и 4500000 у женщин.
Общая поверхность эритроцитов — 3200 м2, что в 1500 раз превышает поверхность человеческого тела.
Эритроцит имеет форму двояковогнутого диска. Такая форма эритроцита способствует лучшему насыщению его кислородом, так как любая точка его отстоит от поверхности не более чем на 0,85 мкм. В случае, если бы эритроцит имел форму шара, центр его был бы удален от поверхности на 2,5 мкм.
Эритроцит покрыт белково-липидной мембраной. Остов эритроцита называют стромой, которая составляет 10% его объема. Особенностью эритроцитов является отсутствие эндоплазматической сети, 71% эритроцита составляет вода. Ядро в эритроцитах человека отсутствует.
Эта возникшая в процессе эволюции особенность его (у рыб, амфибий, плиц эритроциты имеют ядро) также направлена на улучшение дыхательной функции: при отсутствии ядра эритроцит может содержать большее количество гемоглобина, переносящего кислород.
С отсутствием ядра связана невозможность синтеза белка и других веществ в зрелых эритроцитах. В крови (около 1%) встречаются предшественники зрелых эритроцитов — ретикулоциты.
Они отличаются большим размером и наличием сетчато-нитчатой субстанции, в состав которой входят рибонуклеиновая кислота, жиры и некоторые другие соединения. В ретикулоцитах возможен синтез гемоглобина, белков и жиров.
Гемоглобин, его строение и свойства
Гемоглобин (Hb) — дыхательный пигмент крови человека — состоит из активной группы, включающей четыре молекулы гема, и белкового носителя — глобина. В состав гема входит двухвалентное железа, чем и обусловливается способность гемоглобина переносить кислород.
Один грамм гемоглобина содержит 3,2-3,3 мг железа. Глобин состоит из альфа- и бета- полипептидных цепей, включающих по 141 аминокислоте. Молекулы гемоглобина очень плотно упакованы в эритроците, благодаря чему общее количество гемоглобина в крови довольно велико: 700-800 г.
В 100 мл крови у мужчин содержится около 16% гемоглобина, у женщин — около 14%. Установлено, что в крови человека не все молекулы гемоглобина идентичны. Различают гемоглобин А1, на долю которого приходится до 90% от всего гемоглобина крови, гемоглобин А2 (2-3%) и А3.
Различные виды гемоглобина отличаются последовательностью расположения аминокислот в глобине.
При воздействии не гемоглобин различными реактивами глобин отцепляется и образуются различные производные гема. Под вилянием слабых минеральных кислот или щелочей гем гемоглобина превращается в гематин.
При воздействии на гем концентрированной уксусной кислоты в присутствии NaCl образуется кристаллическое вещество, называемое гемином.
В связи с тем, что кристаллы гемина имеют характерную форму, определение их имеет очень большое значение в практике судебной медицины для обнаружения кровяных пятен на любом предмете.
Чрезвычайно важным свойством гемоглобина, определяющим его значение в организме, является способность соединяться с кислородом. Соединение гемоглобина с кислородом получило название оксигемоглобина (HbO2). Одна молекула гемоглобина может связать 4 молекулы кислорода. Оксигемоглобин — соединение непрочное, легко диссоциирующее на гемоглобин и кислород.
Благодаря свойству гемоглобина легко соединяться с кислородом и также легко его отдавать осуществляется снабжение тканей кислородом. В капиллярах легких образуется оксигемоглобин, в капиллярах тканей он диссоциирует с образованием вновь гемоглобина и кислорода, который потребляется клетками.
В снабжении клеток кислородом заключается основное значение гемоглобина, а вместе с ним и эритроцитов.
Способность гемоглобина переходить в оксигемоглобин и наоборот имеет большое значение в поддержании постоянства pH крови. Система гемоглобин-оксигемоглобин является буферной системой крови.
Соединение гемоглобина с окисью углерода (угарным газом) называют карбоксигемоглобином. В отличие от оксигемоглобина, легко диссоциируются на гемоглобин и кислород, карбоксигемоглобин очень слабо диссоциирует.
Благодаря этому при наличии в воздухе угарного газа большая часть гемоглобина связывается с ним, теряя при этом способность к переносу кислорода. Это ведет к нарушению тканевого дыхания, что может вызвать смерть.
При воздействии на гемоглобин окислов азота и других окислителей образуется метгемоглобин, который, также как и карбоксигемоглобин, не может служить переносчиком кислорода.
Гемоглобин можно отличить от его производных карбокси- и метгемоглобина по разнице в спектрах поглощения. Спектр поглощения гемоглобина характеризуется одной широкой полосой.
У оксигемоглобина в спектре имеются две полосы поглощения, расположенные также в желто-зеленой части спектра.
Метгемоглобин дает 4 полосы поглощения: в красной части спектра, на границе красной и оранжевой, в желто-зеленой и сине-зеленой. Спектр карбоксигемоглобина имеет такие же полосы поглощения, как и спектр оксигемоглобина. Спектры поглощения гемоглобина и его соединений можно посмотреть в вернем правом углу (иллюстрация №2)
Резистентность эритроцитов
Эритроциты сохраняют свою функцию только в изотонических растворах. В гипертонических растворах воза из эритроцитов выходит в плазму, что ведет к сморщиванию их и потере ими их функции. В гипотонических растворах вода из плазмы устремляется в эритроциты, которые при этом набухают, лопаются, и гемоглобин выходит в плазму.
Разрушение эритроцитов в гипотонических растворах называют гемолизом, а гемолизированную кровь за ее характерный цвета называют лаковой. Интенсивность гемолиза зависит от резистентности эритроцитов.
Резистентность эритроцитов определяется той концентрацией раствора NaCl, при которой начинается гемолиз, характеризует минимальную резистентность. Концентрация раствора, при которой все эритроциты оказываются разрушенными, определяет максимальную резистентность.
У здоровых людей минимальная резистентность определяется концентрацией поваренной соли 0,30-0,32, максимальная — 0,42-0,50%. Резистентность эритроцитов неодинакова при различных функциональных состояниях организма.
Реакция оседания эритроцитов — РОЭ
Кровь представляет собой устойчивую суспензию форменных элементов. Это свойство крови связано с отрицательным зарядом эритроцитов, который мешает процессу их склеивания — агрегации. Этот процесс в движущейся крови очень слабо выражен. Скопления эритроцитов в виде монетных столбиков, которые можно видеть в свежевыпущенной крови, есть следствие этого процесса.
Если кровь, смешав с раствором, предупреждающим ее свертывание, поместить в градуированный капилляр, то эритроциты, подвергаясь агрегации, оседают на дно капилляра.
Верхний слой крови, лишаясь эритроцитов, становится прозрачным. Высотой этого неокрашенного столбика плазмы определяют реакцию оседания эритроцитов (РОЭ). Величина РОЭ у мужчин равна от 3 до 9 мм/ч, у женщин — от 7 до 12 мм/ч.
У беременных женщин РОЭ может увеличиваться до 50 мм/ч.
Процесс агрегации резко усиливается при изменении белкового состава плазмы. Увеличение количества глобулинов в крови при воспалительных заболеваниях сопровождается вследствие адсорбции их эритроцитами, снижением электрического заряда последних и изменением свойств их поверхности. Это усиливает процесс агрегации эритроцитов, что сопровождается увеличением РОЭ.
Источник: http://www.psyworld.ru/for-students/lectures/anatomy-and-physiology-of-a-childrens-organism/792-2009-10-08-10-38-01.html
Работа № 3. Определение количества эритроцитов в крови
88 выпустите кровь в пробирку с разводящим раствором. Полученное таким образом разведение крови – 1:200. После тщательного перемешивания раствора крови небольшой каплей заполните подготовленную с притертым стеклом камеру Горяева. Предварительно камеру промойте водой и насухо вытрите.
На участок камеры, где нанесены сетки, уложите обезжиренное покровное стекло, при этом нижняя поверхность камеры должна находиться на третьих пальцах обеих рук, двумя вторыми пальцами придерживайте ее спереди.
Двумя пальцами притрите покровное стекло, плавно продвигая его по поверхности прямоугольных пластинок до появления цветных колец Ньютона в местах соприкосновения покровного стекла с поверхностью пластинок камеры. Каплю исследуемой жидкости пипеткой поместите перед щелью, образованной покровным стеклом и пластинкой камеры Горяева с нанесенной сеткой.
Капля должна заполнить камеру самотеком (под действием капиллярных сил. Следите, чтобы в пространстве над сеткой не было пузырьков воздуха и избытка жидкости. До начала подсчета оставьте счетную камеру на 1-2 мин для осаждения форменных элементов. Камеру положите на столик микроскопа и настройте его на малое увеличение (объектив враз, окуляр — вили раз.
Подсчет производите при несколько опущенном конденсоре. Хорошую контрастность обеспечивает фазово-контрастное устройство. Эритроциты считайте в пяти больших квадратах, состоящих из 16-ти малых (5×16 = 80), расположенных по диагонали.
Для записи результатов рекомендуется предварительно начертить на листе 5 больших квадратов, разлинованных на 16 клеток, записывать найденное число эритроцитов в каждую из них. При подсчете необходимо помнить правило буквы Г. Подсчитав число эритроцитов в 80-ти маленьких квадратах (N), рассчитывают число клеток в 1 мкл (мм) крови (X).
Для этого учитываются разведение враз, объем камеры над одним маленьким квадратиком в 89 1/4000 мкл и то, что клетки подсчитывались в 80-ти таких квадратах.
Таким образом, формула для вычисления количества эритроцитов следующая Nх4000х200 80 Полученное количество эритроцитов можно также выразить в количестве на л крови (умножением полученного количества на 10 6), что является стандартной размерностью этого показателя.
Рекомендации по оформлению протокола работы Выводы делаются исходя из того, что в норме количество эритроцитов должно быть таким 3,6-4,5-10 12кл/л — для женщин 4,5-5-10 12кл/л — для мужчин. После небольшой нагрузки — 5-5,5-10 12кл/л. Сразу после рождения количество эритроцитов составляет около 6,0-10 12кл/л (допускаются колебания в пределах 5,4-7,2-10 12
кл/л).
С конца первых — начала вторых суток жизни обычно происходит снижение числа эритроцитов в крови, наиболее выраженное на й день. Минимального значения этот показатель достигает к 2-3 мес, а затем несколько увеличивается ив дальнейшем (с го мес) поддерживается на уровне взрослых. Если количество эритроцитов выше нормы, то это явление называется эритроцитозом, если оно меньше, то налицо эритропения, или анемия. Увеличение количества эритроцитов в крови (эритроцитоз) встречается при ложном эритроцитозе), а также при усилении эритропоэза на фоне неизменной интенсивности гемолиза (истинный эритроцитоз).Уменьшение количества эритроцитов в крови может наблюдаться при гемодилюции ложная эритропения).
Задание 2. Подсчет количества эритроцитов
электрокалориметрическим способом Пипеткой отмерьте 8 мл разводящего раствора (процентный раствор, перенесите всухую пробирку. Далее добавьте 1 капилляр Сали крови, что составляет 20 мкл. Затем измерьте оптическую плотность на ФЭКе при красном светофильтре в кювете толщиной мм. Предварительно нужно выставить ноль по разводящему раствору. Показания снимайте полевой красной шкале. Полученный результат оптической плотности нужно умножить на 10 7, в итоге получается количество эритроцитов в 1 мкл (мм) крови. Рекомендации по оформлению протокола работы Полученную величину сопоставьте с нормальными показателями, оцените функциональное значение эритроцитов в переносе газов крови.
Работа № 4. Определение содержания гемоглобина
Для определения содержания (Н) гемоглобина используется гемоглобинцианидный метод. Принцип метода состоит в том, что к крови добавляется специальный трансформирующий раствор, содержащий сильный окислитель (цианид, при взаимодействии с которым эритроциты разрушаются, гемоглобин выходит в раствори образует окрашенное соединение гемоглобин-цианид.
Интенсивность окраски пропорциональна количеству гемоглобина и фиксируется на ФЭКе или спектрофотометре. Ход работы В пробирку пипеткой перенесите 5 мл трансформирующего раствора. Заберите из пальца кровь капилляром Сали до метки 0,02 и выпустите в раствор.
Раствор крови в трансформирующем растворе аккуратно, но тщательно перемешайте и оставьте на 10–15 мин при комнатной температуре для полного развития окраски (раствор остается стабильным в 91 течение более 24 ч. Таким же образом подготовьте пробу со стандартным раствором гемоглобина 5 мл трансформирующего раствора и один капилляр стандартного раствора гемоглобина (120 гл.
Далее производят измерение оптической плотности опытной и стандартной проб на ФЭКе при длине волны нм (зеленый светофильтр) в кювете толщиной мм. Предварительно выставляется ноль по трансформирующему раствору.
Поскольку содержание гемоглобина в стандартном растворе известно, содержание гемоглобина в опытной пробе рассчитывают в соответствии с пропорцией ст – 120 гл оп – Х гл, где ст – оптическая плотность стандартной пробы оп – оптическая плотность опытной пробы. При использовании спектрофотометра определение оптической плотности проводят при длине волны 540 нм в кювете толщиной мм.
гемоглобина рассчитывают по формуле
Hb (гл) = 367,7D, где D– оптическая плотность раствора. Рекомендации по оформлению протокола работы Полученные результаты занесите в тетрадь протоколов опытов, оцените их и сделайте заключение, исходя из того, что нормальное содержание гемоглобина в крови (нормохромемия) человека – 120–140 гл для женщин, 130– 150 гл для мужчин.
Повышение содержания гемоглобина – гиперхромемия, снижение – олигохромемия. Снижение содержания гемоглобина обычно наблюдается при эритропении, повышение – при эритроцитозе. гемоглобина после рождения составляет 210 гл (180–240 гл. Дальнейшая динамика этого показателя соответствует количественному изменению эритроцитов.
эритроците и цветного показателя крови Расчетные показатели среднего содержания гемоглобина водном эритроците и цветного показателя крови – индексы красной крови – используются для выводов о насыщенности эритроцитов гемоглобином. Расчет среднего содержания гемоглобина водном эритроците производится делением количества гемоглобина (гл) на число эритроцитов (кл/л). В норме содержание гемоглобина водном эритроците колеблется между 27 и 33,3 пг (пг = 10–12
г. Число 33 пг водном эритроците принято за цветной показатель, ЦП, равный 1. Расчет цветного показателя (ЦП) крови производится из соотношения гемоглобина в норме и гемоглобина испытуемого и содержания гемоглобина в норме и гемоглобина испытуемого Число эритроцитов в норме(кл/л) / Число эритроцитов испытуемого кл/л)
ЦП = ——————————————————————————————— .
НЬв норме (гл) / НЬиспытуемого (гл) Рекомендации по оформлению протокола работы Полученные результаты занесите в тетрадь протоколов опытов, сделайте вывод, исходя из того, что в норме цветной показатель крови колеблется от 0,86 до 1,1 (нормохромия).
В случае если он ниже 0,86, то налицо гипо-хромия, а если выше 1,1, то налицо гиперхромия. Сделайте общие выводы о кислородной емкости крови. 93
ФИЗИОЛОГИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ
Повышение защитной функции крови при мышечной работе выражается в увеличении числа лейкоцитов (миогенный лейкоцитоз. При небольших нагрузках это увеличение незначительно и происходит в связи с ростом числа лимфоцитов.
При больших нагрузках миогенный лейкоцитоз может быть выраженным, с явным увеличением числа молодых форм – палочкоядерных и юных лейкоцитов (как следствие раздражения костного мозга) Оборудование спирт, йод, вата, стерильный скарификатор, капилляры Сали, раствор цитрата натрия, процентный раствор уксусной кислоты с добавлением метиленового синего, камера Горяева, покровное стекло, пипетка на объем 1 мл, обезжиренные предметные стекла (обезжиривание стекол производят смесью Никифорова), краска Романовского-Гимза, фосфатный буфер (рН = 7,4), этиловый спирт.
Источник: https://zodorov.ru/uchebno-metodicheskoe-posobie-fiziologiya-krovi-dlya-studentov.html?page=6